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布鲁氏菌病（Brucellosis，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的传染病，潜伏期长，传染性强。世界动物卫生组织（OIE）将其列为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。为防止其扩散和蔓延，保护我省畜牧业健康稳定发展和公共卫生安全，依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规，制定本规范。
1 适用范围
本规范适用于四川省内一切从事牛、羊、猪、鹿、犬等布病易感动物的饲养、经营，以及从事动物防疫活动的单位和个人。
2 牛羊布病的监测
2.1监测主体
县级动物疫病预防控制中心进行血清学初筛，市（州）或省级动物疫病预防控制中心进行复核检测。
2.2监测方法
布病的实验室检测按照农业部“布鲁氏菌病防治技术规范”和有关技术标准，采用虎红平板凝集试验、OIE推荐的间接酶联免疫吸附试验、荧光偏振试验或快速检测卡对待检血清进行初筛，对初筛阳性的样品以试管凝集试验或补体结合试验进行复核。
2.2.1初筛虎红平板凝集试验
虎红平板凝集试验初筛方法：抗原与被检血清（阴、阳性血清做对照）各吸取0.03 ml与玻璃板上，吸管或牙签搅拌混匀，4 min内观察试验结果。出现肉眼可见凝集现象者为阳性，无凝集现象，呈均匀粉红色者为阴性。
2.2.2复核试管凝集试验
每份被检血清需用4支编号的凝集试管。第1管加1.15 ml稀释液（检测羊血清采用10%的盐溶液，其他动物血清采用0.5%石碳酸生理盐水），第2-4管各加入0.5 ml稀释液；然后再在第1管中加入被检血清（阴、阳性血清及抗原液做对照）0.1 ml，弃去0.25 ml混合液后吸取0.5 ml到第2管，倍比稀释至第4管后弃去0.5 ml；将0.5 ml，10倍稀释的抗原加入已稀释好的各血清管中混匀，置37-40℃恒温箱24 h后观察结果。
试管凝集试验参照比浊管制备：每次试验需配比浊管，作为判定凝集反应程度的依据，需用5支编号的凝集试管。第5管加入抗原液1 ml（20倍稀释），第4管加入0.75 ml 抗原液和0.25 ml稀释液，第3管加入0.5 ml 抗原液和0.5 ml稀释液，第2管加入0.25 ml 抗原液和0.75 ml稀释液，第1管仅加入1 ml 稀释液，全部充分混匀置37-40℃恒温箱24 h后观察结果。
参照比浊管，按各试管上层液体清亮度判读：++++菌体完全凝集，100%下沉，上层液体100%清亮；+++菌体几乎完全凝集，液体50%清亮；++菌体凝集显著，液体25%清亮；-凝集物无沉淀，液体均匀混浊。出现牛等大型动物1:100血清稀释，猪、羊等小型动物1:50稀释，出现“++”以上凝集现象时，被检血清为阳性。
2.3结果的判定
非免疫牛羊，试管凝集试验为阳性者判定为布病实验室检测阳性。
2.3.1疑似阳性个体
对未免疫动物通过虎红平板凝集试验、ELISA试验或荧光偏振试验检测，结果为阳性。
2.3.2确诊阳性个体
监测疑似阳性个体经试管凝集试验或补体结合试验，结果为阳性。
2.3.3阳性群体
群体内至少检出1个确诊阳性个体。
2.4监测数量
非免疫地区（甘孜、阿坝除外）：监测每年进行两次。种公牛、奶牛、奶山羊、种羊全群监测；阳性养殖场、与阳性养殖场接触和阳性场区域内的养殖场（户）全群监测；规模养殖场全覆盖，按照存栏量的5%-10%抽检，有条件的养殖场可以自行监测，县动物疫病预防控制中心对结果进行复核；农村散养户按照5%-10%抽查，个别有条件的县（市、区）按照20%抽检；市（州）动物疫病预防控制中心对辖区内监测结果进行抽查、复核。
3 阳性场的扑杀、净化
动物卫生监督机构负责监测阳性场（户）扑杀、净化工作。
3.1阳性场扑杀
非免疫区域：监测到阳性后全群监测，监测阳性率大于或等于40%的养殖场，全群扑杀；监测阳性率小于40%大于等于10%的养殖场，扑杀阳性家畜及与阳性家畜密切接触的同圈（栏）家畜；监测阳性率小于10%的养殖场，扑杀阳性家畜。
3.2无害化处理
阳性病畜、高危家畜及其流产胎儿、胎衣、排泄物、乳、肉、乳肉制品等按照《病害动物和病害动物产品生物安全处理规程》（GB 16548—2006）进行无害化处理。做好相关纪录、报告、扑杀登记备案等。
3.3消毒灭源
对病畜圈舍环境、集中放牧区域、流产胎儿、死胎、胎盘、羊水、流产物、排泄物所污染的垫草和场地进行消毒。
布鲁氏菌对常用化学消毒剂较敏感，日光下曝晒10～20分钟均可杀死此菌。圈舍环境、集中放牧区域夏季可通过阳光或者常用消毒药杀菌；流产的胎儿、排泄物和羊水污染的场地，用10～20%石灰乳或10～20%漂白粉乳浸透垫草和地面。室内用1～3%来苏溶液、1～3%漂白粉上清液、0.3%新洁尔灭溶液、0.1～0.4%二氯异氰脲钠水等消毒药进行消毒。阳性养殖场每天消毒2次，直到养殖场全群监测阴性后180天。
3.4净化措施
养殖场监测到阳性家畜后，根据监测阳性率扑杀家畜，并进行无害化处理，养殖环境及物品彻底消毒，加强饲养管理，增强家畜免疫力；一个月后再次进行全群监测，根据监测阳性率扑杀家畜；扑杀后一个月再次进行全群监测，根据监测阳性率扑杀家畜。监测、扑杀重复进行，直到全群监测为阴性，半年后再次监测为阴性。
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